《Scientific Reports》：First molecular confirmations of Anopheles dirus and Anopheles scanloni in Indonesia, with DNA of zoonotic, enzootic and human malarias detected in An. dirus
編輯推薦：
本研究旨在解決印度尼西亞北蘇門答臘省雖報告高發(fā)諾氏瘧原蟲（P. knowlesi）瘧疾，但傳播媒介未知的問題。研究人員對當(dāng)?shù)匕柞装次媒M（Leucosphyrus Group）蚊種進(jìn)行鑒定，并檢測其頭胸部瘧原蟲（Plasmodium）DNA。結(jié)果首次在印尼分子確認(rèn)了迪羅斯復(fù)合體（Dirus Complex）的兩個物種，并以大劣按蚊（An. dirus）為主，并在其體內(nèi)檢出了包括諾氏瘧原蟲（P. knowlesi）、間日瘧原蟲（P. vivax）等多種人畜共患及人類瘧原蟲DNA，提示該蚊種在當(dāng)?shù)氐膫鞑ブ锌赡馨缪葜匾巧?
在印度尼西亞北蘇門答臘省的朗卡特縣，一種特殊的瘧疾正困擾著當(dāng)?shù)毓残l(wèi)生系統(tǒng)。這種瘧疾的病原體是諾氏瘧原蟲（Plasmodium knowlesi），一種通常在獼猴等靈長類動物間傳播的瘧原蟲，卻能“跨越物種屏障”，感染人類，引發(fā)嚴(yán)重甚至致命的疾病。雖然該地區(qū)報告的諾氏瘧原蟲瘧疾病例數(shù)量居高不下，但一個關(guān)鍵的科學(xué)謎團(tuán)始終懸而未決：究竟是哪一種或哪幾種蚊子，在充當(dāng)著從動物到人類的“橋梁”媒介？這個問題的答案，對于有效控制這種日益受到關(guān)注的人畜共患病至關(guān)重要。為此，一支研究團(tuán)隊深入該地區(qū)，展開了一場尋找“關(guān)鍵媒介”的科學(xué)探索，并將他們的發(fā)現(xiàn)發(fā)表在了《Scientific Reports》期刊上。
為了精準(zhǔn)鎖定傳播媒介，研究人員采用了經(jīng)典的人誘捕法（human landing catch）收集按蚊。他們從形態(tài)學(xué)上將這些蚊子初步歸類為白踝按蚊組（Leucosphyrus Group），但僅憑形態(tài)難以精確到種，尤其是存在近緣種的復(fù)合體。為了得到確鑿的物種身份證據(jù)，研究人員動用了分子生物學(xué)“武器庫”：他們進(jìn)行了內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)2（Internal Transcribed Spacer 2, ITS2）的DNA測序，并采用了針對迪羅斯復(fù)合體（Dirus Complex）的特異性PCR（DiCSIP）以及專門針對斯氏按蚊（Anopheles scanloni）的特異性PCR進(jìn)行鑒定。接下來，為了查明這些蚊子是否攜帶了瘧原蟲，研究人員從蚊子的頭胸部提取樣本，運(yùn)用了針對瘧原蟲18S rRNA基因的逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時定量PCR（reverse-transcription real-time PCR）和巢式PCR（nested PCR）技術(shù)，以檢測、鑒定和區(qū)分不同種類的瘧原蟲DNA。本研究共分析了597只經(jīng)形態(tài)學(xué)初步鑒定的白踝按蚊組蚊子。
分子確認(rèn)印尼首次出現(xiàn)迪羅斯復(fù)合體物種
通過分子鑒定，研究取得了突破性發(fā)現(xiàn)：在印尼境內(nèi)首次從分子層面確認(rèn)了迪羅斯復(fù)合體（Dirus Complex）兩個物種的存在。其中，絕大多數(shù)的蚊子（占97.8%）被確認(rèn)為大劣按蚊（Anopheles dirus），而另外一小部分（占2.2%）則是斯氏按蚊（Anopheles scanloni）。這解決了該地區(qū)媒介物種身份不明的核心問題。
在大劣按蚊體內(nèi)檢出多種瘧原蟲DNA
更關(guān)鍵的結(jié)果來自瘧原蟲檢測。在7只大劣按蚊的樣本中，檢出了瘧原蟲DNA，其中還包括混合感染。檢出的瘧原蟲種類多樣：包括猴瘧原蟲中的諾氏瘧原蟲（P. knowlesi）和英氏瘧原蟲（P. inui），以及主要感染人類的人類瘧原蟲——間日瘧原蟲（Plasmodium vivax）。此外，還有一個樣本同時檢測到柯氏瘧原蟲（P. coatneyi）和諾氏瘧原蟲（P. knowlesi）的信號，但結(jié)果尚不明確。研究人員通過BLAST序列比對分析指出，用于檢測非氏瘧原蟲（P. fieldi）的引物可能與英氏瘧原蟲（P. inui）發(fā)生交叉反應(yīng)，這提示在解釋此類PCR結(jié)果時需要謹(jǐn)慎。
研究結(jié)論與重要意義
本研究首次在印度尼西亞北蘇門答臘省，通過分子手段確鑿地證實(shí)了大劣按蚊（An. dirus）的存在，并同時確認(rèn)了同屬迪羅斯復(fù)合體（Dirus Complex）的斯氏按蚊（An. scanloni）也在當(dāng)?shù)胤植肌Ｑ芯孔钪匾陌l(fā)現(xiàn)是，在主要蚊種大劣按蚊體內(nèi)，同時檢測到了來自獼猴的瘧原蟲（如P. knowlesi, P. inui）和人類的瘧原蟲（P. vivax）的DNA。這一結(jié)果具有重要的流行病學(xué)意義：它強(qiáng)烈暗示大劣按蚊在這一地區(qū)可能扮演著復(fù)雜的多重角色。它不僅可能參與猴類瘧疾（獸傳瘧疾）在動物間的循環(huán)，還可能介導(dǎo)諾氏瘧原蟲從猴到人的人畜共患傳播。更有甚者，由于它也攜帶人類瘧原蟲（P. vivax），它很可能也是傳統(tǒng)人類瘧疾的傳播媒介之一。因此，大劣按蚊被首次指出可能是該地區(qū)人畜共患瘧疾和人類瘧疾傳播的一個潛在關(guān)鍵媒介。這一發(fā)現(xiàn)為理解北蘇門答臘省復(fù)雜的瘧疾傳播動力學(xué)，特別是諾氏瘧原蟲瘧疾的傳播鏈條，提供了至關(guān)重要的直接證據(jù)，也為當(dāng)?shù)刂贫ǜ嗅槍π缘拿浇榭刂撇呗灾该髁诵碌姆较颉?/div>
