《Cell Death & Disease》：TRIP13 promotes the expansion and immunosuppression of CD4+Foxp3+ regulatory T cells by sustaining HAT1 stability
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本研究針對TNF-TNFR2信號通路如何調控調節性T細胞（Treg）擴增的機制不明確問題，揭示了TRIP13通過直接結合HAT1并競爭性抑制UBE4A介導的K48/K29連接多聚泛素化降解，從而穩定HAT1蛋白表達，促進Foxp3+Treg增殖并緩解小鼠結腸炎。該發現為自身免疫性疾病和炎癥性疾病提供了靶向TRIP13/HAT1軸的治療新策略。
免疫系統如同一支精密調控的軍隊，其中調節性T細胞（Regulatory T cells, Treg）扮演著“和平使者”的角色，通過抑制過度免疫反應維持機體穩態。腫瘤壞死因子（TNF）與其受體TNFR2的結合可強力激活并擴增Treg，但這一過程背后的分子機制始終是未解之謎。近年來，靶向Treg已成為治療癌癥、自身免疫病等重大疾病的熱點方向，深入解析TNF-TNFR2通路如何驅動Treg增殖具有重要臨床意義。
為揭示這一機制，南通大學何天珍團隊在《Cell Death and Disease》發表研究，通過RNA測序技術對比TNFR2+與TNFR2缺陷型Treg的基因表達譜，發現甲狀腺激素受體相互作用蛋白13（TRIP13）是TNF-TNFR2信號通路的關鍵下游因子。進一步實驗表明，TRIP13通過其ATP酶活性直接結合組蛋白乙酰轉移酶1（HAT1），阻斷泛素連接酶UBE4A介導的HAT1泛素化降解，從而提升Foxp3表達，促進Treg擴增。在結腸炎小鼠模型中，過表達TRIP13顯著緩解炎癥反應，而敲低HAT1或TRIP13基因則逆轉這一保護效應。該研究首次提出TRIP13/HAT1軸是TNF-TNFR2通路調控Treg穩態的核心環節，為炎癥性疾病的免疫治療提供了新靶點。
關鍵技術方法
研究采用RNA測序篩選差異表達基因；通過慢病毒轉染實現TRIP13、HAT1、UBE4A的過表達或敲低；利用免疫共沉淀（Co-IP）和蛋白質印跡（Western blot）驗證蛋白相互作用與泛素化修飾；構建Treg特異性TRIP13條件性敲除（cKO）小鼠及T細胞轉移性結腸炎模型，結合流式細胞術分析Treg比例與功能；使用ATP酶抑制劑寡霉素（oligomycin）和蛋白酶體抑制劑MG-132探究蛋白穩定性機制。人源Treg實驗使用健康捐贈者外周血分離的CD4+CD25+T細胞。
研究結果
1. TRIP13是TNF-TNFR2通路介導Treg擴增的關鍵因子
RNA測序顯示TNFR2+Treg中TRIP13表達升高約5倍。體外實驗證實TNF通過TNFR2上調TRIP13表達，過表達TRIP13可促進Treg增殖，而敲低TRIP13則抑制TNF或TNFR2激動劑誘導的Treg擴增，且對效應T細胞（Teff）無影響。
2. TNFR2-TRIP13軸在炎癥環境中驅動Treg體內擴增
在TNBS誘導的小鼠結腸炎模型中，腹腔注射TRIP13過表達慢病毒使結腸Treg比例增加17.4%，數量翻倍，并上調增殖標志Ki-67。而TRIP13敲低或Tnfr2基因敲除（KO）小鼠中Treg擴增效應被取消。Treg特異性TRIP13 cKO小鼠結腸炎加重，且Treg免疫抑制功能下降。
3. TRIP13-HAT1相互作用穩定HAT1蛋白并促進Treg增殖
Co-IP與質譜分析鑒定HAT1為TRIP13結合蛋白。TRIP13過表達延長HAT1蛋白半衰期，抑制UBE4A介導的K48/K29連接泛素化降解。在體內，HAT1過表達逆轉TRIP13敲低導致的Treg減少，并恢復Treg關鍵功能分子CTLA-4和GITR的表達。
4. UBE4A通過泛素化降解HAT1抑制Treg穩態
UBE4A作為E3泛素連接酶促進HAT1的K23和K33位點泛素化降解。過表達UBE4A抵消HAT1對Treg的擴增作用，而突變HAT1的K23R/K33R可抵抗UBE4A介導的降解。
5. TRIP13依賴ATP酶活性競爭性抑制UBE4A-HAT1相互作用
TRIP13與UBE4A結合HAT1的區域重疊，過表達TRIP13可阻斷UBE4A對HAT1的降解。ATP酶抑制劑寡霉素削弱TRIP13-HAT1結合，表明TRIP13的ATP水解活性是維持該互作的關鍵。
6. TRIP13-HAT1軸在T細胞轉移模型中介導結腸炎保護作用
在Rag1-/-小鼠中共同移植天然Treg與Teff后，TRIP13過表達使結腸Treg比例提升7.5倍，并顯著緩解結腸炎癥病理指標，該效應可被HAT1敲低逆轉。相反，移植TRIP13缺陷型Treg時，HAT1過表達無法抑制結腸炎。
結論與意義
本研究首次闡明TRIP13-HAT1分子軸在TNF-TNFR2信號通路中的核心地位：TRIP13通過ATP酶依賴性結合HAT1，競爭性阻斷UBE4A介導的泛素化降解，從而穩定HAT1蛋白并促進Foxp3+Treg擴增與免疫抑制功能。在炎癥環境中，該通路對維持Treg穩態至關重要。研究不僅深化了對Treg調控機制的認知，更為自身免疫病、器官移植排斥等T細胞介導的炎癥性疾病提供了靶向TRIP13/HAT1的治療新思路。未來需進一步探索TRIP13激動劑的設計及組織特異性遞送策略，以最大化治療潛力并減少脫靶效應。
