《Genes & Immunity》：m6A RNA methylation modulates antiviral response in celiac disease
編輯推薦：
編輯薦讀：為破解“病毒感染如何點燃乳糜瀉自身免疫”這一懸案，作者以m6A表觀轉錄組為切入口，發現病毒模擬物+麥膠協同上調IRF7并放大炎癥；降脂老藥辛伐他汀可“擦除”該修飾，顯著降低IRF7-STAT1-CXCL10軸，為替代終身無麩質飲食提供可轉化新策略。
乳糜瀉（celiac disease，CeD）患者一旦攝入麥膠，小腸便如被點燃的火藥桶，迅速觸發自身免疫炮火。然而，為何有人終生食麥無恙，有人卻一觸即發？越來越多線索指向“病毒導火索”——尤其是腸道雙鏈RNA病毒如呼腸孤病毒（reovirus）。既往小鼠研究提示，reovirus感染可打破口服耐受，誘導麥膠特異性T細胞狂飆，但病毒信號如何被腸道上皮“翻譯”成持續炎癥，仍缺一塊關鍵拼圖。表觀轉錄組學興起后，N-甲基腺苷（mA）作為mRNA最豐富的內部修飾，被喻為“RNA世界的音量旋鈕”，其動態調控抗病毒與自身免疫通路，卻尚未在乳糜瀉中被系統解析。于是，Maialen Sebastian-delaCruz等提出假設：病毒觸發的mA重編程可能放大麥膠誘導的IRF7-IFN軸，成為CeD自身免疫的“音量放大器”；若能靶向該旋鈕，或可為苦于終身無麩質飲食（gluten-free diet，GFD）的患者提供可藥物化的新策略。
研究基于西班牙兒科隊列，整合血清、小腸活檢與體外-外植體模型，分四步展開：①臨床驗證reovirus-CeD關聯；②構建“病毒+麥膠”體外模型，鎖定IRF7為mA調控節點；③解析mA writer（METTL3）、eraser（ALKBH5）及reader（YTHDC2）對IRF7翻譯的精細調控；④用辛伐他汀（simvastatin，SV）干預，評估其模擬GFD轉錄譜的潛力。
關鍵技術方法：兒科及成人乳糜瀉血清與十二指腸活檢樣本（ESPGHAN診斷標準）；HCT-15腸上皮細胞系建立病毒模擬物PIC+麥膠肽PTG聯合刺激模型；mA-RIP-qPCR、RNA-RIP、siRNA與過表達質粒功能驗證；組織外植體24 h藥物孵育；LINCS-L1000FW數據庫比對藥物-疾病轉錄譜。
研究結果
乳糜瀉患者抗病毒與mA基因同步高表達
對62例活動期CeD與39例非CeD對照血清檢測發現，CeD抗reovirus IgG顯著升高；活檢中IRF7、IRF3、STAT1及趨化因子CXCL10 mRNA同步上調；整體mA水平升高，METTL3、YTHDC1/2、YTHDF1等mA機器組件表達增加，且與抗病毒基因呈正相關，提示兩者被共同“踩下油門”。
麥膠協同病毒模擬物通過mA增強IRF7表達
在PIC模擬dsRNA病毒基礎上加用PTG，IRF7 mRNA與蛋白水平呈協同升高，而IRF3無此效應；meRIP-qPCR證實IRF7編碼序列兩個預測mA motif修飾顯著增加；METTL3過表達或去甲基化酶ALKBH5敲低均提升IRF7，反之亦然，表明mA正向調控IRF7。
mA-YTHDC2互作是IRF7翻譯的“開關”
構建mA位點靜默突變（A→C同義突變）的IRF7-MUT質粒，發現其mRNA水平與野生型相當，但蛋白下降50%，且下游STAT1、CXCL10同步下調；RIP證實YTHDC2僅與野生型IRF7 mRNA結合，過表達YTHDC2可提升IRF7蛋白，說明mA通過招募YTHDC2增強翻譯延伸，而非影響mRNA穩定性。
靶向mA降低IRF7可抑制炎癥級聯
METTL3 siRNA或10 μM辛伐他汀處理，均減少IRF7蛋白及CXCL10表達；外植體實驗顯示，SV使活動期CeD活檢IRF7、STAT1 mRNA下降，而克羅恩病對照無顯著變化；LINCS數據庫比對發現，SV誘導的基因表達譜與GFD患者高度相似，且可逆轉活動期CeD特征譜，提示SV具有“化學模擬無麩質飲食”的潛力。
結論與討論
該研究首次在人類樣本層面證實：reovirus感染通過提升mA水平，強化IRF7翻譯，放大麥膠觸發的IFN-STAT1-CXCL10炎癥軸，構成CeD自身免疫的“病毒-表觀轉錄-免疫”三連環。靶向mA不僅揭示病毒如何“點燃”乳糜瀉，也為終身GFD提供了一條可藥物化的替代路徑——老藥辛伐他汀憑借其降低mA、重塑轉錄譜的雙重能力，成為極具轉化前景的“舊藥新用”候選。未來圍繞mA疫苗或特異性writer/reader抑制劑的開發，或將讓CeD患者真正告別“無麥不成餐”的枷鎖。
