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基于蛋白質組學的LC–MS/MS方法發現并絕對定量水溶性特征肽,用于山羊角的質量評估
《Phytochemical Analysis》:Discovery and Absolute Quantification of Water-Soluble Signature Peptides via LC–MS/MS Based on Proteomics for Quality Evaluation of Goat Horn
【字體: 大 中 小 】 時間:2026年01月11日 來源:Phytochemical Analysis 2.6
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山羊角作為瀕危薩加角的傳統替代品,本研究通過超聲波輔助提取結合質譜分析,發現13個特征肽段可區分5種牛科動物角,并建立7個特征肽段的絕對定量方法。優化的質量控制標記為GHpep7和GHpep11,具有高豐度和低批次變異(RSD<15%)。該方法顯著縮短樣本制備時間至6小時以內,為山羊角質量控制提供新范式。
山羊角是傳統醫學中替代瀕危賽加羚羊角的主要材料,F有的質量控制(QC)方法缺乏特異性,無法有效檢測出于經濟目的而混入的其他?苿游锝堑那闆r。
本研究旨在發現具有物種特異性的肽,并開發一種基于質譜技術的可靠方法,以鑒定山羊角并量化其特征肽。
采用無標記蛋白質組學策略,對五種?苿游锏囊鹊鞍酌赶a物進行了分析:山羊角(來自Capra hircus)、羊角(Ovis aries)、水牛角(Bubalus bubalis)、牛角(Bos taurus)和牦牛角(Bos grunniens),使用nanoLC-Orbitrap質譜儀篩選特征肽。同時開發了一種新型超聲輔助同步提取-酶解(UASEE)方法用于樣品制備。在UHPLC–MS/MS平臺上建立了七種山羊角肽的絕對定量方法。共分析了22批山羊角樣品。
鑒定出13種能夠明確區分五種牛科動物的特征肽。UASEE方法將樣品制備時間縮短至24–6小時內。定量方法表現出良好的線性(r≥0.997)、精度(RSD<8.2%)、重復性(RSD<5.8%)、穩定性(RSD<9.2%)和準確性(回收率84.6%–114.2%,RSD<13.9%)。根據定量結果,GHpep 7(平均含量0.224 mg/g)和GHpep 11(平均含量0.137 mg/g)被選為最佳質量控制標志物,因為它們的豐度高且批次間變異性。≧SD<15%)。
本研究利用UASEE和LC–MS/MS技術建立了山羊角特征肽的發現和絕對定量平臺,有效解決了摻假問題,并為山羊角的質量控制標準奠定了基礎。
作者聲明不存在利益沖突。
支持本研究結果的數據可應合理要求向通訊作者索取。