《GeroScience》：Association between cagemate number and risk of death in mice: a time-varying covariate analysis using Cox frailty models
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為解決“動態(tài)籠伴數(shù)量是否及如何影響小鼠死亡風(fēng)險(xiǎn)”這一被長期忽視的動物福利與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)難題，ITP團(tuán)隊(duì)利用2 635只UM-HET3小鼠隊(duì)列，采用Cox frailty模型嵌套隨機(jī)效應(yīng)，首次發(fā)現(xiàn)雌性死亡率隨籠伴減少而陡升（HR 0.92→1.96），雄性則無顯著波動，提示社交緩沖對雌性 longevity 具關(guān)鍵意義。
在生命科學(xué)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的舞臺上，實(shí)驗(yàn)小鼠不僅是“工具”，更是會呼吸、會社交、會因孤獨(dú)而折壽的個體。過去半個世紀(jì)，從肥胖到衰老，從腫瘤到代謝，無數(shù)突破都誕生在塑料盒與刨花之間。然而，一個被默認(rèn)卻鮮被量化的變量——“籠子里還剩幾只同伴”——始終躲在實(shí)驗(yàn)記錄的邊緣。傳統(tǒng)長壽研究把“籠伴死亡”簡單視為樣本流失，卻沒人追問：當(dāng)昔日三姐妹只剩一位“孤鼠”時，她的生理時鐘是否突然加速？當(dāng)雄性領(lǐng)地里的對手接連倒下，幸存王者是享天年還是松一口氣？更棘手的是，現(xiàn)行指南只給“群養(yǎng) vs 單養(yǎng)”的二元建議，對“動態(tài)密度”沉默不語，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)偏差與福利隱患被一并忽略。
為填補(bǔ)這一空白，Thirupathi R. Mokalla 等人盯上了美國國家老齡化研究所（NIA）旗下赫赫有名的Interventions Testing Program（ITP）數(shù)據(jù)庫。該計(jì)劃橫跨三大中心（The Jackson Laboratory、密歇根大學(xué)、德克薩斯大學(xué)），歷時多年，旨在篩選可重現(xiàn)的延壽藥物。原始隊(duì)列含2 635只基因異質(zhì)且均一化的UM-HET3小鼠，雌雄分籠，初始每籠3～4只，研究期間不重新編組，恰好讓“自然減員”成為天然實(shí)驗(yàn)變量。作者借此開展了一項(xiàng)“事后深挖”式的時變生存分析，核心問題只有一個：籠伴數(shù)量變化是否以性別特異的方式改寫了死亡風(fēng)險(xiǎn)？
論文最終發(fā)表于《GeroScience》，用數(shù)據(jù)回答了“社交隔離會加速雌性小鼠死亡”的假設(shè)，并呼吁把“動態(tài)籠伴數(shù)”正式納入實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與動物福利規(guī)范。
主要技術(shù)路線可概括為“四大件”：
公共隊(duì)列再利用——獲取ITP已公開發(fā)表的2 635只UM-HET3小鼠生存 raw data；
時變協(xié)變量構(gòu)建——將“每日仍存活的同籠個體數(shù)”作為 time-varying covariate；
嵌套隨機(jī)效應(yīng)Cox frailty模型——以site→cage兩級隨機(jī)效應(yīng)校正中心差異與籠內(nèi)聚集性；
邊際均值配對比較——用emmeans包估算不同籠伴數(shù)下雌雄死亡風(fēng)險(xiǎn)比（HR）及標(biāo)準(zhǔn)誤。
研究結(jié)果
一、“籠伴數(shù)量主效應(yīng)”顯著
首先運(yùn)行僅含性別、治療組、籠伴數(shù)及性別×治療交互的Cox frailty模型。Type 3 方差分解顯示，無論性別或藥物處理，living cagemate number 對死亡風(fēng)險(xiǎn)具有獨(dú)立顯著影響（p＜0.001），提示“身邊還有幾只同類”確實(shí)與小鼠壽命相關(guān)。
二、“性別×籠伴數(shù)量”交互顯著
進(jìn)一步加入性別×籠伴數(shù)交互項(xiàng)后，交互效應(yīng)p＜0.001，證實(shí)雌雄對社交密度變化的響應(yīng)曲線顯著分離。
三、雌性死亡風(fēng)險(xiǎn)隨籠伴減少陡升
邊際估算給出雌性四檔HR（以3只同伴為參照）：
四、雄性死亡風(fēng)險(xiǎn)與籠伴數(shù)無關(guān)
雄性對應(yīng)HR依次為1.14、1.06、0.98、0.91，置信帶包含1.0且無明顯單調(diào)趨勢，提示在不存在血腥打斗的前提下，籠伴增減對雄性生存并無顯著增益或危害。
五、藥物處理效應(yīng)被社交變量“稀釋”
在兩種模型中，治療主效應(yīng)及治療×性別交互均不顯著（p 0.14–0.42），說明若忽視社交環(huán)境波動，藥效評估可能受未測量偏倚干擾。
結(jié)論與討論
文章以“數(shù)據(jù)說話”的方式確認(rèn)：社交隔離是一種被低估的生存風(fēng)險(xiǎn)因素，其效應(yīng)量在雌性小鼠中與部分已上市延壽藥物相當(dāng)甚至更大。研究者指出，雌性鼠偏好“依偎—筑巢”行為，社會緩沖（social buffering）可抑制HPA軸過度激活，降低慢性應(yīng)激損傷；相反，雄性鼠在群養(yǎng)條件下需維持優(yōu)勢等級，同伴死亡反而可能減少攻擊應(yīng)激，因此未見負(fù)面效應(yīng)。該發(fā)現(xiàn)為以下三方面帶來啟示：
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)——長壽與慢病研究應(yīng)把“cagemate number as a time-varying covariate”寫進(jìn)方案，必要時采用“補(bǔ)籠”或“恒定密度”策略，減少幸存者偏差。
動物福利——雌性實(shí)驗(yàn)鼠應(yīng)避免長期獨(dú)居；若單籠需手術(shù)或代謝測量，應(yīng)設(shè)置“鄰籠視覺—嗅覺接觸”或短期回群，以緩解隔離應(yīng)激。
轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)——社交環(huán)境對壽命的影響具有性別差異，提示未來人群研究在分析孤獨(dú)與健康結(jié)局時亦需分層討論，不可“男女合并”。
作者也坦承局限：數(shù)據(jù)來自單一UM-HET3遺傳背景，缺乏死因明細(xì)與行為學(xué)記錄；未測量等級地位、環(huán)境富集等潛在混雜。但正因如此，后續(xù)多中心、多品系、多物種驗(yàn)證將成為“社交-壽命”交叉研究的新藍(lán)海。
一句話總結(jié)：當(dāng)實(shí)驗(yàn)記錄再次寫下“cagemate found dead”時，研究者或許該多想一步——剩下的那一位，正悄悄被孤獨(dú)推向生命終點(diǎn)。
