摘要

三甲胺N-氧化物（TMAO）與急性胰腺炎（AP）的發(fā)病和進(jìn)展有關(guān)。清益湯（QYD）在中國(guó)醫(yī)院中被廣泛用于治療急性胰腺炎及其并發(fā)癥。本研究旨在探討清益湯通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物群代謝物TMAO在緩解嚴(yán)重急性胰腺炎相關(guān)肺損傷（SAP-ALI）中的作用和機(jī)制。使用LC–MS/MS技術(shù)分析了清益湯的成分。通過(guò)將5%牛磺膽酸鈉（STC，50 mg/kg）逆行注射到胰膽管中，建立了SAP大鼠的肺損傷模型。通過(guò)ELISA、蘇木精和伊紅染色、透射電子顯微鏡、RT-qPCR、免疫組化和Western blot分析等方法，評(píng)估了外源性TMAO、3,3-二甲基-l-丁醇（DMB）和清益湯對(duì)SAP大鼠肺微血管內(nèi)皮屏障損傷的影響。同時(shí)建立了HUVECs和單核細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)系統(tǒng)的體外TMAO誘導(dǎo)損傷模型。采用RNA測(cè)序（RNA-seq）技術(shù)研究了TMAO對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響。通過(guò)RT-qPCR、Western blotting、流式細(xì)胞術(shù)、TUNEL檢測(cè)、PI染色和免疫熒光等方法，探討了TMAO是否誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡以及清益湯對(duì)此過(guò)程的影響。通過(guò)拯救實(shí)驗(yàn)研究了高遷移率盒1（HMGB1）的關(guān)鍵作用。結(jié)果表明，清益湯顯著減輕了SAP大鼠的胰腺炎癥和肺損傷，降低了TMAO水平，并有效抑制了SAP期間HMGB1介導(dǎo)的肺內(nèi)皮功能障礙。RNA-seq、scRNA-seq分析和體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)TMAO可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。從機(jī)制上講，清益湯可能通過(guò)抑制介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的TMAO-HMGB1通路發(fā)揮保護(hù)作用，為SAP的治療提供了潛在策略。