摘要

三陰性乳腺癌（TNBC）是一種臨床侵襲性較強的亞型，目前可用的治療策略非常有限。盡管長鏈非編碼RNA（lncRNAs）與腫瘤進展的關(guān)聯(lián)日益密切，但它們在TNBC過程中對巨噬細胞極化的調(diào)控作用仍不清楚。本研究探討了lncRNA PVT1與PPARγ之間的分子相互作用，以及這些相互作用如何驅(qū)動TNBC進展過程中的巨噬細胞重編程。通過使用原位TNBC小鼠模型，單細胞RNA測序（scRNA-seq）鑒定出九種不同的細胞類型，偽時間軌跡分析顯示在腫瘤晚期階段巨噬細胞數(shù)量顯著增加。對巨噬細胞的重新分類表明，在TNBC發(fā)展過程中以M2型巨噬細胞為主。通過對TNBC巨噬細胞進行批量測序，并結(jié)合GEO/TCGA數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)PPARγ是關(guān)鍵調(diào)控因子，而PVT1則是TNBC組織與正常組織中差異表達的lncRNA。體外實驗表明，敲低PVT1或調(diào)節(jié)PPARγ活性會改變巨噬細胞的極化類型，進而影響MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌細胞的增殖和侵襲能力。機制研究表明，RNA/DNA pull-down實驗和熒光素酶檢測證實PVT1能夠招募NOP56和E2F1形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，從而增強E2F1對PPARγ的表達。在體內(nèi)實驗中，由PVT1沉默的THP-1/MDA-MB-231細胞混合物生成的腫瘤表現(xiàn)出生長受到抑制、M1型巨噬細胞數(shù)量增加以及凋亡水平升高（TUNEL檢測結(jié)果）；而PPARγ過表達則加速了腫瘤進展，并導(dǎo)致以M2型巨噬細胞為主的浸潤（流式細胞術(shù)分析）。這些發(fā)現(xiàn)表明，lncRNA PVT1是一個關(guān)鍵的表觀遺傳調(diào)控因子，它通過協(xié)調(diào)NOP56-E2F1-PPARγ信號通路，使巨噬細胞向促腫瘤生長的M2型表型轉(zhuǎn)變，從而加劇TNBC的侵襲性。本研究通過破壞PVT1-PPARγ軸來調(diào)控巨噬細胞動態(tài)并誘導(dǎo)腫瘤抑制性免疫反應(yīng)，為TNBC的治療提供了新的靶點。