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        體驗新一代轉染系統——Neon NxT電轉染系統

        【字體: 時間:2023年12月19日 來源:賽默飛世爾科技

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          Invitrogen™ Neon™ NxT電轉染系統是新一代電轉染平臺,它采用創新設計簡化了哺乳動物的細胞轉染流程。

        Invitrogen™ Neon™ NxT電轉染系統是新一代電轉染平臺,它采用創新設計簡化了哺乳動物的細胞轉染流程。生物相容的移液器吸頭和緩沖液管中的電極可產生比傳統電轉染裝置更均勻的電場,從而顯著提高轉染效率和細胞活力。

        Neon NxT移液器吸頭用作轉染室,無需將您的樣本轉移至單獨的電轉染比色皿中。通過減少移液的次數可以節省時間,有助于最大限度地減少樣本損失,減少細胞受到的剪切力,并降低樣本污染的風險。憑借Neon NxT電轉染的簡單工作流程,您甚至可以滿懷信心地轉染最具挑戰性的細胞系。

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        使用Neon NxT電轉染系統,您可以獲得:

        • 可靠的性能和極佳的細胞活力—采用我們專有的電轉染吸頭技術,可幫助您自信地轉染具有挑戰性的細胞系并保持細胞活力。

        • 節省珍貴樣本—獨特的Neon NxT移液器吸頭無需單獨的電轉染比色皿或孔板,同時該儀器的小巧設計使其能夠輕松地安裝在生物安全柜內。您寶貴的細胞不會因樣本轉移而丟失,并降低了污染風險。

        • 節省時間—采用相同的緩沖液試劑盒,通過三個簡單的步驟轉染細胞。只需吸取細胞并將遞送物質遞送至Neon NxT移液器吸頭中,將其置于移液器工作站,按下開始。現在,轉染的細胞可以轉移至培養容器中。

        • 靈活性—針對不同的細胞類型、細胞密度、遞送物質和應用,精確優化您的電轉染參數。每次可轉染1×104 至1x107個細胞。

        經證實的轉染效率

        采用我們專有的電轉染吸頭技術,您可以高效轉染具有挑戰性的哺乳動物細胞,同時保持高細胞活力。我們觀察到了卓越的轉染效率(圖1)和細胞活力(圖2),即使是對于轉染極其困難的細胞,如免疫細胞、原代細胞和干細胞也是如此。

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        圖1. Neon NxT電轉染系統的轉染效率。在10 μL或100 μL電轉染反應中,采用GFP質粒DNA或GFP mRNA轉染細胞。轉染效率為GFP陽性細胞的百分比(n=3)。注:初始T細胞僅在100 μL反應中進行電轉染。

        卓越的細胞活力

        我們珍視您的細胞。Neon NxT電轉染系統能夠在更加可控的條件下進行電轉染,并省去了兩個移液步驟。此外,細胞經受的剪切力也更小,因為它們不需要被移進和移出單獨的電轉染比色皿,有效降低細胞死亡率,這在處理難以生長或轉染的細胞時尤為重要(圖2)。Neon NxT電轉染系統中的電極間隔較寬,且表面積極小。一次性Neon NxT移液器吸頭包含其中一個電極,而另一個電極位于NeonNxT緩沖液管的底部。較小的表面積產生更均勻的電場,并且pH值變化極小。電轉染過程中產生的熱量和離子較少,因此細胞生理條件不會受到嚴重干擾。

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        圖2. Neon NxT系統電轉染后的細胞活率。在10 μL或100 μL電轉染反應中,采用GFP質粒DNA或GFP mRNA轉染細胞。用Invitrogen™ SYTOX™紅色死細胞染色劑對轉染細胞進行染色,并在Invitrogen™ Attune™ NxT流式細胞儀上評估細胞活率。細胞活率(%)以3次測量的平均值報告。注:初始T細胞僅在100 μL反應中進行電轉染。

        提高基因編輯效率

        Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸基因編輯緩沖液經專門設計,通過在轉染后同源定向修復(HDR)提高基因編輯效率。當與Neon NxT 電轉染系統和我們的基因編輯試劑一起使用時,Neon NxT 重懸基因編輯緩沖液可以幫助改善特定遞送物質(如CRISPRCas9)的基因編輯性能,特別是在涉及哺乳動物細胞的敲入實驗時,包括原代細胞、干細胞和難以轉染的細胞(圖3)。

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        圖3. Neon NxT重懸基因編輯緩沖液在基于CRISPR-Cas9的不同細胞類型和靶標的基因編輯實驗中的性能。靶位點包括Jurkat和K562細胞的ACTN、活化原代T細胞的TRAC、HSC的B2M和原代NK細胞的AAVS1。在10 _L或100 _L反應中電轉染細胞。(A)GFP供體DNA敲入效率報告為GFP陽性細胞的百分比。(B)GFP供體DNA敲入后細胞的活率。(C)敲除效率報告為與未處理對照相比的特定靶位點減少百分比。對于原代NK細胞,通過基因組剪切檢測(GCD)測定indel效率(%)作為敲除效率的替代。(D)敲除細胞的轉染后活率。

        節省研究時間

        簡化工作流程

        在使用儀器時,我們需要一些對于初學者和專家來說都容易使用的操作。 Neon NxT 系統僅需3 個簡單的步驟:吸樣、電轉染和分液。精簡的工作流程易于遵循和執行,由此培訓花費的時間極少,提高了一致性和可重復性。

        縮短處理時間

        與常規電轉染系統相比,我們專有的電轉染技術不僅簡化了工作流程,還將整個過程縮短至10-15 分鐘[1]。無需蓋蓋、開蓋以及將樣本移進和移出單獨的電轉染比色皿——轉染發生在NeonNxT 移液器吸頭中。

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        1 個緩沖液試劑盒適用于多種哺乳動物細胞類型

        可省去尋找適用于您細胞系的緩沖液試劑盒的麻煩。通過采用一個與150 多種哺乳動物細胞系兼容的緩沖液試劑盒,我們簡化了這一過程。此外,我們還建議在低于1,900 V 的電壓下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸R 緩沖液,在更高的電壓下使用Invitrogen™ Neon™ NxT 重懸T 緩沖液。該套裝還包括Neon NxT 重懸基因編輯緩沖液,可實現出色的基因編輯效率。使用我們優化的方案轉染常用細胞系,或按照我們新細胞系的標準流程優化轉染方案。

        省時的孔板設置

        孔板設置模式將效率提升至另一個水平。Neon NxT 電轉染系統的直觀用戶界面為您的電轉染實驗設置提供了一種有效的方法。您可以預先設置整個孔板,并在對每個樣本進行電轉染時在屏幕上監控進度,而非使用Quick Start 調整樣本之間的電轉染參數。

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        技術參數

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