流式細胞技術給我們帶來了精準又漂亮的數據，但對操作的高要求及平臺儀器的排隊使用，使實驗汪們痛苦不堪。美國ORFLO公司*新推出的經濟型的新一代流式細胞儀MoxiGO™II可以完美解決以上問題。

首先，它體積非常小巧，重量只有3.18kg，儀器內置4500mAh鋰電池，便于在實驗室內的移動和隨意放置；內置軟件程序，800X480彩色觸摸屏，可清晰呈現數據結果，讓您一目了然。

其次，Moxi GO™II將細胞計數的金標準--庫爾特電阻抗檢測技術與雙通道熒光檢測技術兩種模式完美結合~只需在觸摸屏幕上點觸、滑動，即可獲得包括：基于庫爾特原理的細胞計數和細胞粒徑，以及基于細胞單熒光或雙熒光標記的細胞活性、細胞凋亡、細胞轉染效率、免疫細胞、細胞內活性氧、線粒體膜電位等的檢測數據。

圖1：庫爾特原理示意圖

細胞數量、粒徑的檢測金標準——庫爾特原理：（如圖1所示）懸浮在緩沖液中的細胞隨緩沖液通過小孔時，取代相同體積的緩沖液，由于細胞的導電性能和緩沖液不同，在恒定電流設計的電路中，這種情況會導致檢測孔內外兩電極見間電阻發生瞬時變化，產生電位脈沖。脈沖信號的大小和次數與通過細胞的大小和數目成正比。利用其**的薄膜傳感器技術對細胞進行數量、直徑等的檢測，獲取更加精準可靠的數據。

 
圖2：熒光檢測的原理

細胞熒光檢測的原理：（如圖2所示）當對細胞大小檢測的同時，以傳統流式的方法利用激光器（488nm）激發標記在細胞上的1~2種特異性熒光染料，并自由選擇通過1或2個特異性的PMT（525/45nm，561nm/LP）進行熒光檢測，分別獲取相應通道的熒光信號。

操作非常簡單：（如圖3所示）Moxi GO™II采用了卡槽式的微流樣本芯片設計將芯片插入卡槽，上樣，只需3-4步，即可獲得檢測結果，操作非常簡便。

 
圖3：Moxi GO™II的操作步驟

芯片內有細胞過濾功能，無需對細胞懸液進行濾網的過濾，直接將細胞加入膜片孔內即可，膜片的窗口處為非透明材質做成，形成小的避光暗室，避免了熒光檢測過程中熒光猝滅現象（如圖4所示）。

 
圖4：微流控芯片結構

 
圖5：Moxi GO™II觸摸屏操作界面

Moxi GO™II將常用的流式實驗程序內置在軟件中，在實驗過程中只需點擊要進行的實驗名稱即可完成相應的數據檢測，應用哪個，點哪個。無需進行復雜的操作培訓，即可快速獲取所需數據~

性能展示：

我們來看一下基于庫爾特原理的細胞計數（如圖6所示）：將Moxi GO™II與臺式流式細胞儀、成像細胞分析系統、血細胞計數板進行比較。結果發現，對于細胞的計數誤差要低于其他類型產品，而計數平均值的變異系數（CV＜5%）也是*小的，可見 Moxi GO™II對于細胞數量的檢測表現優異。

圖6：基于不同原理的細胞計數準確性的比較

Moxi GO™II的應用實例：

該儀器配備有雙PMT，可兼容實驗室常用染料，525/45nm PMT可兼容染料有：FITC, GFP, Alexa Fluor 488nm, Calcein 等，561nm/LP PMT可兼容染料有：PI, PE, DS Red, Sytox Orange, 7 AAD, Nile Red, Rhodamine Red, Sun Coast Yellow, PE/Cy5等。雙PMT可同時檢測，互不影響，也可選擇您所需要的通道進行檢測，使用靈活~

應用案例一：細胞凋亡檢測

 
圖7：細胞凋亡檢測

在正常的活細胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細胞膜的內側。在凋亡的細胞中，PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中。Annexin-V是磷脂結合蛋白，能與PS高親和力結合。用FITC標記的 Annexin-V 作為探針可檢測細胞凋亡的發生。PI能夠透過凋亡中晚期的細胞和死細胞的細胞膜，使細胞核紅染。因此將 Annexin-V-FITC 與 PI 配合使用，可以將凋亡早期細胞、凋亡晚期細胞、健康細胞區分開來。預置的細胞凋亡APPs可直接給出細胞分析的結果。

應用案例二：細胞轉染效率評估

圖8：細胞轉染效率評估

該實驗對HCT-15細胞系轉染表達GFP的質粒后，對細胞的轉染效率進行評估，10s即可得到圖示結果。圖8右：做轉染處理的細胞與未做轉染處理的細胞，兩組檢測數據的overlay可以在軟件上自動生成。
應用案例三：PBMCs免疫細胞分型（細胞表面染色）

 
圖9：PBMCs免疫細胞分型（細胞表面染色）

從人外周血分離出的PBMCs，用FITC標記的CD3抗體和用PE標記CD4抗體進行免疫染色，在Moxi GO™II上進行熒光值的分析，可快速獲得不同免疫細胞亞型的比例。

應用案例四：細胞內P-ERK蛋白表達檢測（ICW）

 
圖10：細胞內P-ERK蛋白表達檢測（ICW）

從人外周血分離出來的PBMCs細胞用激活劑進行激活，使細胞內ERK蛋白發生磷酸化。處理結束后，對細胞進行固定、透化，用PE標記的P-ERK單細胞抗體進行免疫染色。

如圖9所示：彩色為激活劑處理樣本。灰色：未加激活劑處理樣本。

應用案例五：細胞內活性氧檢測

 
圖11：細胞內活性氧檢測

用TBHP 誘導Jurkat細胞產生氧化應激反應，產生的活性氧會使加入的CellROX Orange染料發出熒光。因此通過檢測CellROX Orange的熒光值可計算活性氧比例。當TBHP和NAC同時處理細胞時，TBHP誘導的氧化應激反應會被抗氧化劑NAC所抑制。導出的FCS3.1數據可導入到電腦版flow jo軟件中進行數據分析。

應用案例六：線粒體膜電位檢測

圖12：線粒體膜電位檢測

TMRE 是一種可以透過細胞膜的陽離子染料，容易透過帶負電的線粒體膜而累積。線粒體膜電勢的大小決定了TMRE的攝取量 (高的MFI =高的線粒體膜電勢=健康的細胞)，因此可以用細胞內TMRE的熒光值評估線粒體膜電勢。如圖12所示， Jurkat細胞經喜樹堿處理后，其線粒體膜電勢下降；t=0(gray) 、t=25hr (red/purple)。

總結：Moxi GO™ II新一代雙熒光流式細胞分析儀，體積小巧，功能強大，一次檢測可以獲得基于庫爾特原理的金標準計數和基于熒光原理的的雙熒光通道檢測數據，讓您不再需要進行復雜的流式細胞儀操作學習，不再承受排隊之苦，操作簡單，隨時隨地進行檢測，趕快把它抱回實驗室吧~

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