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通過 Opal 多重染色深入洞察組織樣本
【字體: 大 中 小 】 時間:2016年12月29日 來源:珀金埃爾默
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顛覆傳統免疫組化的創新型技術!解除相同種屬來源抗體不能復染在一起的限制,輕松實現七色免疫熒光染色。通過辣根過氧化物酶介導的活化反應,將熒光信號直接富集標記到目標抗原上,在確保特異性著色的同時,大幅提高信號強度和穩定性。標記熒光分子以共價鍵形式與抗原穩定結合,通過洗脫抗體后的多輪復染,實現多色免疫熒光染色。
研究癌癥生物學和評估復雜的生物學功能需要結合組織成像提供的背景,同步分析多個通路。常規方法提供的分析并不完整。流式細胞儀在復合分析中表現突出,但會破壞組織提供的原位信息。如果對連續切片中的單個標記物進行分析,則無法探求單細胞的共表達,尤其同時分析三個或更多標記物時更是如此。
多標記免疫組化染色存在諸多困難,例如抗體物種的相似性和交叉反應、多輪處理后的標簽穩定性、高低信號之間的平衡以及弱表達標記物的檢測等,因此,開發能同時檢測FFPE組織或冷凍切片中三個或更多生物標記物的穩定方法充滿挑戰。

上圖:乳腺癌免疫圖像,PD-L1(兔)---黃色;CD8(小鼠)---紅色;CD4(小鼠)--- 綠色;CD20(小鼠)---橙色;細胞角蛋白 AE1/AE3(小鼠)---青色;細胞核 (DAPI)---藍色。
采用Opal方法和TSA Plus熒光試劑染色,在Vectra上成像。
圖片來源:PerkinElmer組織應用團隊
解決方案:Opal 多重組織染色
借助Opal™,您可以克服這些挑戰,從而實現穩定且高特異性的組織生物標記物復染檢測。您可以不根據物種而根據性能來選擇抗體。典型的四重Opal染色流程可在一天之內完成,兼容標準IHC工作流程。
Opal 可以幫助您實現:
• 一次對三種或更多組織生物標記物進行染色和成像
• 使用在相同物種來源的多種一抗抗體, 并且不會產生交叉干擾
• 查看流式細胞儀丟失的原位背景
• 在同一個組織切片中確認多種生物標記物的單細胞共表達
• 節約寶貴的組織的同時獲得更多信息
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