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讓蛋白純化像提質粒一樣簡單[新品推薦]
【字體: 大 中 小 】 時間:2015年08月06日 來源:生物通
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與核酸純化相比,蛋白純化可是一項相當艱苦的工作。純化時間長,操作步驟繁瑣。有時,在實驗室呆了一整天,換來的卻是讓人傷心的結果,蛋白得率低,純度差。這時你也許會想,如果純化蛋白像提質粒一樣簡單就好了。
與核酸純化相比,蛋白純化可是一項相當艱苦的工作。純化時間長,操作步驟繁瑣。有時,在實驗室呆了一整天,換來的卻是讓人傷心的結果,蛋白得率低,純度差。這時你也許會想,如果純化蛋白像提質粒一樣簡單就好了。
如今,你的夢想成真了。Clontech(Takara旗下)推出了新一代的蛋白純化試劑盒 – His-Tagged Purification Miniprep Kit。真的就像質粒純化一樣,加樣、結合、清洗、溶出,幾次離心,5分鐘即可純化出100 μg His-tag融合蛋白。

這個系統在純化柱中安裝了尼龍膜,能夠在室溫下快速操作,無需等待,并且與哺乳動物和細菌的細胞兼容。細胞裂解液中通常有各種添加劑存在,比如β-巰基乙醇、EDTA、DTT、甘油等,沒關系,這個系統也能穩定發揮高性能。
純化柱中的尼龍膜經過改良,膜的表面積大,能產生高純度、濃縮的蛋白質。通過這種技術,尼龍膜的蛋白結合能力可媲美樹脂,甚至更強。與樹脂相比,膜的滴下速度快,可在短時間內進行純化。柱床體積小,可進行少量、高濃度的溶出。
從2-5 ml培養液中制備出200-800 μl細胞裂解液,加入純化柱后經過平衡、結合、洗滌和溶出,5分鐘即可完成純化,最多獲得100 μg His-tag融合蛋白。濃度大約在0.3-1 mg/ml。操作流程簡便,時間短,可降低蛋白質降解或活性損失的風險,讓下游應用的成功率更高。
His-Tagged Purification Miniprep Kit包含迷你型純化柱以及純化所需的全部Buffer(xTractor、洗滌用、溶出用),可供20次純化使用。另外,Clontech也在不斷豐富和完善Capturem™系列產品,最新推出的Maxiprep kit(code No.635713)和His-Tagged Purification 96(code No.635714)兩款產品樣品起始量、收量、蛋白濃度等均有提升。聽說在美國賣瘋啦,要不你也試試?