過去6年，生物通一直在追蹤生命科學領域最前沿的創新產品，將其介紹給大家。2014年，生物通繼續搜羅新上市的產品，為大家奉上一場技術盛宴。經過一個半月的網頁和微信投票以及專家評鑒，2014生命科學十大創新產品終于出爐。

在2014年，CRISPR基因組編輯技術無疑是一顆閃亮的明星。文章的接連發表，顯示出CRISPR技術在科學研究和疾病治療中的巨大潛力。然而，這種技術也并非完美，多項研究表明，CRISPR/Cas9系統可能存在脫靶效應。為了克服這一點，Sigma-Aldrich公司推出了改造的產品 – CRISPR配對切口酶。

Cas9-D10A切口酶配合一對gRNA使用，可以減少意外的脫靶基因修飾。它分別在相對的兩條DNA鏈上產生切口，從而形成功能性的雙鏈斷裂。這種設計能最大限度降低脫靶效應，同時保持高效而又特異的基因修飾。為此，CRISPR配對切口酶被生物通讀者評為2014年度的創新產品。

此前，Broad研究院的張鋒博士曾在《Cell》雜志上發表文章，證實Cas9切口酶突變體的使用能降低CRISPR/Cas9系統的脫靶效應1。在那項研究中，通過配對切口，基因組編輯的脫靶效應被降低50-1500倍。作者認為，這種策略可應用于需要高特異性的基因組編輯研究。

如今，Sigma-Aldrich公司CRISPR配對切口酶的上市，讓研究人員也能享用到這一成果。大家可能比較關心，如何設計和訂購這一產品。Sigma-Aldrich目前提供預制的CRISPR/Cas9產品，覆蓋人、大鼠、小鼠的編碼基因。大家可聯系客服或在網上進行選擇和訂購。網址如下：https://crispr.sigmainformatics.com/CrisprSearch.php。當然，大家也可以定制自己的CRISPR/Cas9產品。

在基因組編輯領域，Sigma-Aldrich一直敢為人先。多年前，它就率先推出了基因組編輯工具鋅指核酸酶（ZFN）。CRISPR/Cas9是Sigma-Aldrich公司推出的新一代基因組編輯工具。隨著技術的發展和應用，Sigma不斷更新和完善CRISPR產品，以滿足廣大客戶的需求。

• Cas9/gRNA單質粒系統

Cas9和gRNA構建在單個載體上，提高轉染效率；此外，GFP與Cas9共表達，可實現對陽性細胞的富集；優化配置的啟動子則可大大提高gRNA和Cas9在細胞內的表達效率。

• Cas9-D10A雙切口酶系統

改造的Cas9-D10A配合使用一對gRNA，利用雙切口酶活性增強識別特異性，最大限度地降低脫靶效應。

• 高度純化的RNA系統

純化的gRNA和Cas9 mRNA直接用于胚胎顯微注射，可避免啟動子不兼容性和質粒隨機整合的風險，尤其適用于胚胎注射以及對dsDNA敏感、存在啟動子細胞不兼容的細胞。

除此之外，Sigma還可提供適合各類CRISPR產品的陽性和陰性對照，以及詳細的技術介紹和應用說明，保證您的工作更簡化、更高效。

我想了解Sigma-Aldrich的CRISPR/Cas9產品

參考文獻

1. F. Ann Ran, Patrick D. Hsu, Chie-Yu Lin, Jonathan S. Gootenberg, Silvana Konermann, et al. Double Nicking by RNA-Guided CRISPR Cas9 for Enhanced Genome Editing Specificity. Cell, Volume 155, Issue 2, 10 October 2013, Pages 479-480