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        自動化設備讓Western blot無壓力[新品推薦]

        【字體: 時間:2013年11月14日 來源:生物通

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          之前對Western的優化主要集中在轉印,時間縮短,效率提高,但之后的封閉、抗體孵育也頗為繁瑣,容易出錯。iBind™全自動蛋白印跡處理系統將轉印之后的步驟自動化,幫助您獲得更佳的實驗結果。

        對于研究信號通路的實驗室而言,Western blot就是家常便飯吧。這個實驗,難度并不大,就是步驟多、耗時長,從早忙到晚,有時還要等明天。如今,什么都自動化了。在面包機中加入面粉、牛奶、酵母……,哇,就等著松軟的面包新鮮出爐吧。在Western blot中,如果也有這樣的“面包機”,那就好了。

        Life Technologies真的推出了這樣的儀器,那就是iBind™全自動蛋白印跡處理系統。之前對Western的優化主要集中在轉印,時間縮短,效率提高,但之后的封閉、抗體孵育也頗為繁瑣,容易出錯。iBind將轉印之后的步驟自動化,幫助您獲得更佳的實驗結果。

        這是如何實現的呢?據介紹,iBind系統不需要外部電源,采用獨特的SLF(sequential lateral flow)技術。這種技術通過在iBind™ 卡片上施加機械壓力,讓一抗和二抗及時釋放。iBind™ 卡片中嵌入的玻璃纖維允許抗體和洗滌液以恒定的速度流過印跡膜。這樣,您加入試劑后就可以離開,系統自動完成封閉、一抗孵育、二抗孵育和清洗等步驟。

        相對于手動操作,iBind帶來了更高的靈敏度,更低的背景,且每次實驗間的一致性更好。據介紹,自動化處理的CV(變異系數)低于5%,而手動處理高達13%。此外,實驗流程也大大縮短,從原來的十幾個小時縮短到2.5小時,而設置時間也僅需15分鐘。這些步驟完成后,印跡膜即可取出,進行顯色。

        事實勝于雄辯,下面我們來看看iBind自動處理和手動處理的結果對比。

        (A-B)磷酸化Akt的Western blot(從左到右:30 µg–500 ng細胞提取物)。對于iBind處理,500 ng細胞提取物中的磷酸化Akt即可檢測,而手動處理時4 µg中的目標才能檢測。(C-D)表達CREB的細胞裂解液的Western blot(從左到右:30 µg–1 µg細胞裂解液)。經iBind處理,6 µg細胞裂解液中的CREB即可檢測,而手動處理要達到10 µg。

        目前,Life Technologies提供iBind™起始套裝,內含一臺iBind蛋白印跡處理儀、一盒iBind 卡片(10張)和一個iBind溶液試劑盒,讓您能立即開始操作。這個卡片和溶液都是耗材,之后還需購買。每張卡片可運行一張迷你的膜。現在新品上市,價格還未知,請咨詢Life Technologies。立即索取iBind蛋白印跡處理系統的資料與報價

        Life Tech在優酷上發布了iBind系統的操作視頻。若您希望自己來試試,也可申請免費試用。即日起至2013年11月30日,填寫申請表格,將獲得精美水杯一個(限50份)。活動詳情請看:www.lifetechnologies.com/ibind。(生物通 余亮)

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