編者按：產(chǎn)品好不好，用過才知道。在選購產(chǎn)品時(shí)，參數(shù)固然重要，但過來人的評(píng)論似乎更有意義。為此，生物通收集了多名用戶的使用體驗(yàn)，真實(shí)地告訴您產(chǎn)品優(yōu)缺點(diǎn)是什么，到底好不好用，讓您買的放心，用的舒心。這一次，我們先從Western blot開始。

說到ECL，做Western blot的人幾乎沒有不知道吧。自1990年上市以來，增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）蛋白印跡產(chǎn)品庫不斷豐富，以適應(yīng)常規(guī)蛋白檢測(cè)到更為復(fù)雜的應(yīng)用。有了ECL，蛋白分析比以往更加快速，也更加靈敏。

Amersham ECL Prime是這個(gè)家族的新成員。它在靈敏度方面至少是ECL plus的兩倍，其最低檢測(cè)限（LOD）達(dá)到pg級(jí)。此試劑的特點(diǎn)在于大幅增加了信號(hào)的穩(wěn)定性，這使得反復(fù)曝光變成可能，并能夠在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中輕松地進(jìn)行多個(gè)印跡處理。

此外，ECL prime所發(fā)射的信號(hào)強(qiáng)度提高了3到5倍，這也就意味著ECL prime可采用比ECL plus低3倍的一抗和二抗進(jìn)行檢測(cè)，這不僅降低了背景，也節(jié)省了抗體的費(fèi)用。

斯坦福大學(xué)的Hugo Hilton博士在Western blot實(shí)驗(yàn)中就使用ECL。前面的步驟就不贅述了。對(duì)于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，他將1 mL ECL Prime檢測(cè)試劑溶液A與1 mL溶液B混合，加到NC膜上，在室溫下孵育5分鐘。然后用保鮮膜把膜包起來，放在X光膠片暗盒內(nèi)。在暗室中放入X光膠片，曝光1、3、5分鐘，顯影。

Hilton認(rèn)為，ECL Prime的靈敏度非常高。廠家的使用說明中提到該試劑能檢測(cè)低至1 pg的目的蛋白。在使用過程中，他們也的確能檢測(cè)到其他化學(xué)發(fā)光試劑所檢測(cè)不到的目的蛋白。X光膠片曝光3分鐘能帶來良好的信號(hào)，適合條帶的定量分析。

正是由于ECL Prime的靈敏度高，Hilton在實(shí)驗(yàn)中對(duì)一抗和二抗進(jìn)行了更高倍數(shù)的稀釋，至少是其他試劑的5倍，這也節(jié)省了不少一抗的費(fèi)用。Hilton還提到，在與ECL試劑共同孵育時(shí)，一定要確保膜被試劑完全覆蓋。

其他用戶也認(rèn)為ECL Prime是個(gè)靈敏、易用的檢測(cè)試劑。泰國瑪希隆大學(xué)的Narisorn Kitiyanant提到：“這是個(gè)非常靈敏的ECL。有時(shí)在倒入膜中之前，我們會(huì)用蒸餾水將其稀釋。它需要孵育5分鐘，就這么簡單。”波多黎各大學(xué)癌癥中心的Magaly Martinez-Ferrer認(rèn)為：“使用起來非常簡單。有時(shí)只孵育1分鐘。背景很低。”

如此看來，ECL Prime的確是個(gè)人見人愛的好東西哦。GE Healthcare目前提供兩種規(guī)格，分別為50 ml和150 ml的包裝，適合1000 cm²和3000 cm²的膜。對(duì)于用量大的實(shí)驗(yàn)室來說，大包裝無疑更劃算。（生物通 余亮）

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