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生物通官微
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年度創(chuàng)新:RapidTip純化吸頭
【字體: 大 中 小 】 時(shí)間:2011年12月21日 來源:生物通
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參加2011生命科學(xué)十大創(chuàng)新產(chǎn)品評選,了解生命科學(xué)發(fā)展的新動(dòng)向!PCR產(chǎn)物純化雖不是個(gè)復(fù)雜的事,但在樣品多時(shí),也還是蠻讓人頭疼的。如今,美國Diffinity Genomics公司推出了RapidTip快速PCR產(chǎn)物純化吸頭,能在1分鐘內(nèi)完成PCR產(chǎn)物純化。僅僅60秒,引物和dNTP都隨風(fēng)而去了。
PCR產(chǎn)物純化雖不是個(gè)復(fù)雜的事,但在樣品多時(shí),也還是蠻讓人頭疼的。比如Sanger測序,一下子幾十個(gè)樣品,結(jié)合、洗滌、洗脫,也得花費(fèi)不少時(shí)間,還需要化學(xué)試劑與儀器設(shè)備的輔助。如今,美國Diffinity Genomics公司推出了RapidTip快速PCR產(chǎn)物純化吸頭,能在1分鐘內(nèi)完成PCR產(chǎn)物純化。僅僅60秒,引物和dNTP都隨風(fēng)而去了。
這種RapidTip吸頭采用創(chuàng)新的技術(shù),在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格的移液器吸頭中加入了專利的吸附材料。純化過程僅僅需要一個(gè)步驟,耗時(shí)僅一分鐘,極大地減少了純化和準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的時(shí)間。對于100 bp-10 kb范圍的DNA片段,回收率高于90%;同時(shí)可有效去除PCR反應(yīng)中的雜質(zhì),包括核苷酸、引物和引物二聚體。
它是如何工作的呢?這種與眾不同的吸頭與大部分傳統(tǒng)的單道或多道、手動(dòng)或自動(dòng)移液器兼容。含有DNA和雜質(zhì)的樣品吸入吸頭內(nèi),其中雜質(zhì)在1分鐘內(nèi)被吸附。這時(shí),排出溶液即獲得純的DNA,也就是我們所需的產(chǎn)物(下圖)。裝吸頭,吸取,排液,就這么簡單。一分鐘,一個(gè)步驟,“臟”溶液進(jìn)去,“干凈”溶液出來。與傳統(tǒng)的PCR純化方法相比,大約快了50倍。

(圖片來自Diffinity 公司網(wǎng)頁)
RapidTip吸頭可容納20-30 µl的PCR反應(yīng)。如果樣品少于20 µl,而濃度又比較高的話,可以稀釋至25 µl。簡單的操作步驟幾乎不需要對實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn),也無需固定設(shè)備(例如離心機(jī),磁力提取,真空歧管)。同時(shí),它也很環(huán)保,廢棄物只有功能性吸頭。無需額外的材料、吸頭、柱子、緩沖液、或試劑來純化PCR產(chǎn)物。
這項(xiàng)看似很小的發(fā)明為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省了不少時(shí)間和勞力,同時(shí)改善了樣品處理和實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。對于樣品量大的實(shí)驗(yàn)室,還可將此吸頭用于自動(dòng)化系統(tǒng),進(jìn)一步提高通量。
目前,Diffinity僅有RapidTip這一種產(chǎn)品,但該公司正利用相似的差異親和技術(shù),為更多的應(yīng)用開發(fā)更多的吸頭,如自動(dòng)化應(yīng)用、限制性酶消化、從凝膠中回收DNA、以及新一代測序的文庫制備。(生物通 余亮)
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