第一站我們要介紹的是Promega公司。在生物技術(shù)這個(gè)年輕的領(lǐng)域中，Promega公司進(jìn)駐中國(guó)已有26年的歷史，可不是一般的長(zhǎng)。而且，相對(duì)于其他進(jìn)口品牌，該公司產(chǎn)品價(jià)格親民。在物價(jià)飛漲的今天，這一點(diǎn)更是難能可貴。

回到正題，關(guān)于基因組DNA的純化，Promega提供了豐富的產(chǎn)品。若是一一介紹，恐怕大家看了更暈。那么，生物通先給大家介紹兩款經(jīng)典產(chǎn)品，然后再?gòu)牟煌瑯悠奉愋腿胧郑�并結(jié)合樣品起始量和通量，分別介紹最新產(chǎn)品。

經(jīng)典產(chǎn)品之一：Wizard^® 基因組DNA純化試劑盒

此試劑盒是基于經(jīng)典的沉淀法，可從全血、組織培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物及植物組織、酵母、革蘭氏陽(yáng)性及革蘭氏陰性細(xì)菌中提取基因組DNA，純化方法簡(jiǎn)單、快速。

操作過(guò)程也是經(jīng)典的4步。首先是裂解細(xì)胞和細(xì)胞核。對(duì)于全血的DNA提取，這一步則包括裂解紅細(xì)胞，接著裂解白細(xì)胞和細(xì)胞核。如果需要，在這一步可加入RNase消化。接著通過(guò)鹽沉淀步驟去除胞內(nèi)蛋白。之后，通過(guò)異丙醇沉淀濃縮基因組DNA，并通過(guò)乙醇洗滌。純化得到的DNA可用于擴(kuò)增反應(yīng)、限制性酶切消化和膜雜交等多種應(yīng)用。

這一試劑盒能夠勝任多種材料，對(duì)樣品的起始量要求也很廣。以全血為例，低至50 μl，高至10 ml都OK。因此，的確是實(shí)驗(yàn)室的不錯(cuò)選擇。價(jià)格方面，500次（每次300 μl全血）試劑盒的價(jià)格為2,742元，單次不到5.5元。

采用Wizard^® 基因組DNA純化試劑盒從不同起始材料中純化DNA的產(chǎn)量如下：

經(jīng)典產(chǎn)品之二：Wizard^® Magnetic 96 食品DNA 純化系統(tǒng)

此系統(tǒng)可從多種天然和加工食物中純化出DNA，包括谷物種子、谷物粉、大豆、大豆粉和豆奶、薯片、巧克力及含巧克力的食品、蛋黃和植物油等。從這些樣品中純化出的DNA 可用于轉(zhuǎn)基因作物（GMO）的序列測(cè)定。

純化過(guò)程使用了MagneSil^® 順磁性顆粒，僅需極少的離心，也不需有機(jī)溶劑抽提，快速簡(jiǎn)便，僅用常規(guī)方法1/3 的時(shí)間即可完成。此試劑盒的價(jià)格為13,203元/400次。

除了這兩個(gè)經(jīng)典產(chǎn)品，Promega近幾年也推出了不少新產(chǎn)品，可滿足你的“三高”要求——純度高、產(chǎn)量高、通量高。生物通將按照樣品類型一一介紹。

組織

我們都知道，若DNA樣品有酒精殘留，可能會(huì)抑制下游的酶解反應(yīng)。為解決這一問(wèn)題，Promega推出了ReliaPrep™ 組織基因組DNA小提系統(tǒng)。它提供了完整即用的方法，可從高達(dá)25mg組織、1個(gè)口腔拭子、或1cm的剪斷鼠尾中純化得到高純度的gDNA。整個(gè)操作過(guò)程僅需30分鐘或更短，無(wú)需酒精洗滌或沉淀即可得到完整的gDNA，適合基因分型、芯片和測(cè)序等苛刻應(yīng)用。

這個(gè)試劑盒采用的是柱提法，也是簡(jiǎn)單的4步。首先破碎起始材料，釋放DNA；然后讓DNA與ReliaPrep™結(jié)合柱結(jié)合；利用洗滌液去除雜質(zhì)；最后是洗脫。不過(guò)此洗滌液不同于以往的70%乙醇，也就避免了乙醇?xì)埩羲鶐��?lái)的問(wèn)題。此外，系統(tǒng)中的試劑都以即用型提供，無(wú)需添加或配制。

血液

Promega提供了ReliaPrep™、Wizard^®以及Maxwell^® 三個(gè)系列的gDNA純化試劑盒，能夠從哪怕最具挑戰(zhàn)性的血液樣品中提取基因組DNA。前面提到的經(jīng)典產(chǎn)品Wizard^® 基因組DNA純化試劑盒就能從50 μl–10 ml全血中提取gDNA。

若血液量較少，你還可以試試ReliaPrep™血液基因組DNA小提系統(tǒng)。它的特點(diǎn)同上，無(wú)需酒精洗滌，即可從多達(dá)200μl血液或體液中始終如一地提取到純凈的完整基因組DNA。基因組DNA可以從新鮮的或冷凍的血液中制備，在不到40分鐘內(nèi)可得到4–10μg的預(yù)期DNA產(chǎn)量，當(dāng)然這取決于血液樣品中的白細(xì)胞數(shù)目。

若血液量較多，ReliaPrep™大容量高通量gDNA提取系統(tǒng)則更為合適。它能以規(guī)格可調(diào)的模式從3-10ml血樣中提取基因組DNA。該方法無(wú)需繁瑣的離心步驟，也無(wú)需使用有毒試劑，而這些是沉淀提取法所固有的。ReliaPrep™大容量高通量gDNA提取系統(tǒng)已在Hamilton Robotics MICROLAB^® STARplus液體處理工作站中實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，可以一次性處理96個(gè)樣品。對(duì)于一次最多32個(gè)樣品的低通量gDNA提取，可以使用ReliaPrep™ 32 LV HSM的手動(dòng)模式，由用戶手動(dòng)進(jìn)行移液。

上面介紹的這些產(chǎn)品大部分采用手動(dòng)操作來(lái)提取gDNA。隨著人們對(duì)速度、質(zhì)量的要求不斷提高，有些實(shí)驗(yàn)室也開(kāi)始嘗試使用自動(dòng)化的純化系統(tǒng)。Maxwell^® 16儀器便是Promega公司近年來(lái)推出的一款純化儀。

Maxwell^® 16儀器可自動(dòng)純化高質(zhì)量DNA、RNA、病毒總核酸和重組蛋白，均衡性好，省時(shí)省力，可滿足多種下游應(yīng)用。純化的介質(zhì)為順磁性顆粒，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的最佳捕獲、洗滌以及洗脫。與傳統(tǒng)的硅膠膜方法相比，磁珠帶來(lái)了更高的結(jié)合量和更干凈的洗脫。將樣品或樣品裂解物直接加入預(yù)先裝有試劑的試劑筒內(nèi)，即可按“開(kāi)始”鍵，啟動(dòng)純化程序。試劑盒與自動(dòng)純化程序均經(jīng)過(guò)優(yōu)化，能夠從特定樣品中純化出最高質(zhì)量的目標(biāo)用于下游實(shí)驗(yàn)。

Maxwell^®16自動(dòng)純化儀有兩種配置可供選購(gòu)：用于得到最大產(chǎn)量的SEV (Standard Elution Volume，標(biāo)準(zhǔn)洗脫體積，200-400μl)，和用于得到最高濃度的LEV(Low Elution Volume，低洗脫體積，30-100μl)。此外，SEV和LEV儀器均可配置Flexi Method 固件，用戶可以自行構(gòu)建Maxwell^® 16自動(dòng)純化儀的程序，做進(jìn)一步的性能優(yōu)化。

Maxwell^® 16自動(dòng)純化儀預(yù)置有純化程序，試劑盒內(nèi)有預(yù)先裝有各步驟試劑的條形試劑筒，這些程序與試劑盒最大限度地增加了操作的簡(jiǎn)便程度。在18-50分鐘內(nèi)（取決于樣品的類型），該自動(dòng)純化儀可處理1-16個(gè)樣品。有了Maxwell^® 16，你就可以有更多時(shí)間去完成其他更具創(chuàng)造性的工作。

目前，Promega提供了以下試劑盒，可用于Maxwell^® 16自動(dòng)純化儀。

若您對(duì)于選擇什么樣的純化產(chǎn)品還是心里沒(méi)底，那么可以登陸Promega英文網(wǎng)站。它上面有個(gè)小工具—核酸純化產(chǎn)品選擇器，通過(guò)幾個(gè)簡(jiǎn)單的問(wèn)答（如樣品量和通量），就可以推薦適合的產(chǎn)品，相當(dāng)方便。當(dāng)然，你也可以點(diǎn)擊此處索取gDNA純化的相關(guān)資料。（生物通 余亮）

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