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植物RNA提取的利器[新品推薦]
【字體: 大 中 小 】 時間:2009年03月04日 來源:百泰克公司
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通用植物總RNA提取試劑盒:解決了長期以來因為植物多糖多酚導致RNA難以提取的難題,使得不管哪種植物的RNA提取都變得很容易!該產品上市以來,為無數的植物研究者帶來極大便利!
——百泰克通用植物總RNA快速提取試劑盒
有許多植物就是由于未能有效地分離純化其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面研究的進展。這些植物組織中,或富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產物,或RNase的活性較高。在完整的細胞內這些物質在空間上與核酸是分離的,但當組織被研磨,細胞破碎后,這些物質就會與RNA相互作用。酚類化合物被氧化后會與RNA不可逆地結合,導致RNA活性喪失及在用苯酚、氯仿抽提時RNA的丟失,或形成不溶性復合物;而多糖會形成難溶的膠狀物,與RNA共沉淀下來;萜類化合物和RNase會分別造成RNA的化學降解和酶解。對于這些植物材料,用常規的RNA提取方法(如胍法、苯酚法和十六烷基三甲基溴化胺法等)難以提取出其RNA!
縱觀國際上RNA提取的試劑盒,如常見的TRIzol,以及一些知名名牌的RNA提取試劑盒均很難從多糖多酚的植物中提取高質量的RNA,酚類物質的含量會隨著植物的生長而增加。因而從幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,針葉類植物的針葉中多酚的含量比在落葉植物的葉子中要高得多。在植物材料勻漿時,酚類物質會釋放出來,氧化后使勻漿液變為褐色,并隨氧化程度的增加而加深,這一現象被稱為褐化效應。被氧化的酚類化合物(如醌類)能與RNA穩定地結合,從而影響RNA的分離純化;多糖的污染是提取植物RNA時常遇到的另一個棘手的問題。植物組織中往往富含多糖,而多糖的許多理化性質與RNA很相似,因此很難將它們分開。在去除多糖的同時RNA也被裹攜走了,造成RNA產量的減少;而在沉淀RNA時,也產生多糖的凝膠狀沉淀,這種含有多糖的RNA沉淀難溶于水,或溶解后產生粘稠狀的溶液。由于多糖可以抑制許多酶的活性,因此污染了多糖的RNA樣品無法用于進一步的分子生物學研究。
Trizol主要成份是異硫氰酸胍和苯酚,沒有特殊去除多糖和多酚的試劑,所以對于大多數多糖多酚的植物無法成功提取,即使添加了如2-巰基乙醇、二硫蘇糖醇(DTT)或半胱氨酸之類的防止酚氧化的試劑也很難提取。RNeasy Plant Mini Kit主要裂解液是鹽酸胍或則異硫氰酸胍,有些公司進行改進之后添加了諸如PVP40等結合多酚的試劑,亦無法取得讓人滿意的結果。
百泰克公司在RNA提取方面積累了豐富的實踐經驗,開發出通用植物總RNA快速提取試劑盒,使客戶幾乎不需要再查很多相關的資料,不需要花很多的時間和精力去尋找提取合適植物樣品的試劑盒!在百泰克所試驗的一百多例多糖多酚植物中,無一例外的提取出來高質量的RNA,其中包括棉花、蘋果、葡萄、草莓、香蕉、龍眼、荔枝、番茄果實、茄子、松針、楊樹、擬南芥種子、菠蘿蜜、馬蹄金、早熟禾、高羊茅、云杉、松樹、紫椴、花楸、白樺、山毛櫸、海棠花、槭槭、紫羅蘭、毛爪草、丁香、月季、天竺葵、仙客來、菊花、牽;、紫松果、彩葉草、一品紅、夾竹桃、垂葉榕等。
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