創(chuàng)新點(diǎn)：EmeraldAmp™實(shí)現(xiàn)通用性強(qiáng)、簡(jiǎn)單方便的PCR擴(kuò)增反應(yīng)，PCR反應(yīng)液呈艷綠色，可以直接進(jìn)行電泳，并且對(duì)GC rich模板也能進(jìn)行良好擴(kuò)增。

特點(diǎn)：
對(duì)GC rich模板也能進(jìn)行良好擴(kuò)增。
操作簡(jiǎn)便的預(yù)混型制品。
可以進(jìn)行Hot Start PCR反應(yīng)。
PCR反應(yīng)液呈艷綠色，電泳時(shí)指示效果明顯。
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳。

EmeraldAmp™ PCR Master Mix是PCR反應(yīng)用各種試劑（酶、Buffer、dNTP Mixture等）的2倍濃度的預(yù)混型制品。DNA Polymerase使用了性能良好的Hot Start酶。使用本制品時(shí)，只需要在制品溶液中加入模板和引物便可進(jìn)行PCR反應(yīng)，簡(jiǎn)化了操作步驟，減少了PCR操作過程中的污染。并且，本制品中已含有電泳時(shí)所必需的色素試劑（藍(lán)色和黃色色素），PCR反應(yīng)后可以直接進(jìn)行電泳。反應(yīng)液為鮮艷的綠色（Emerald Green），電泳時(shí)指示效果明顯，容易觀察樣品的電泳位置。
使用EmeraldAmp™ PCR Master Mix擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3′端附有一個(gè)“A”堿基，可直接克隆于T-Vector中。EmeraldAmp™ PCR Master Mix對(duì)GC Rich模板也能得到良好擴(kuò)增，以人基因組DNA為模板可以擴(kuò)增10 kbp的DNA片段。

PCR反應(yīng)性能
以人基因組DNA為模板，可以很好擴(kuò)增8.5 kbp的DNA片段。

電泳時(shí)色素Marker位置
反應(yīng)液5 ml，1% Agarose電泳時(shí)，藍(lán)色色素在3～5 kbp附近，黃色色素在50 bp以下位置。

通常PCR反應(yīng)使用量
1. 按下列組份配制PCR反應(yīng)液。

EmeraldAmp™ PCR Master Mix 25 ml
模板DNA*   X ml
引物 1（20 mM） 0.5 ml
引物 2（20 mM） 0.5  ml
滅菌蒸餾水              Up to 50 ml

*【50 ml PCR反應(yīng)體系中模板DNA推薦使用量】
人基因組DNA  50 ng～100 ng
質(zhì)粒DNA 1 pg～1 ng

2. PCR反應(yīng)條件。
3 Step PCR
98℃     10 sec
55℃ or 60℃*  30 sec      
72℃ 1 min/kbp
30個(gè)循環(huán)

* 擴(kuò)增GC Rich模板時(shí)，退火溫度可以使用60℃。
2 Step PCR
98℃ 10  sec
68℃ 1 min/kbp*    

30個(gè)循環(huán)

* 延伸時(shí)間設(shè)定在15 min以上時(shí)，擴(kuò)增產(chǎn)物有時(shí)會(huì)產(chǎn)生Smear現(xiàn)象。

應(yīng)用例
將插入5 kbp以上DNA片段的pUC118文庫(kù)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，對(duì)大腸桿菌菌落進(jìn)行陽性克隆的篩選。

電泳結(jié)果如下：

1~8：菌落PCR反應(yīng)液           
M：λ-Hind III digest DNA Marker   

1% Agarose；5 ml電泳

通過電泳確認(rèn)插入片段大小，選取PCR產(chǎn)物與目的片段大小一致的陽性菌落。