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取代Real-time PCR的基因定量技術[新品推薦]
【字體: 大 中 小 】 時間:2009年10月16日 來源:吉泰生物
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在傳統的PCR方法中,抽提步驟和RT-PCR的步驟在定量過程中是最受爭議的地方,而QG方法只需要簡單的細胞溶解過程。這個系統是全自動的,并且已經在臨床上應用十年以上。單基因無需昂貴的設備,僅需要普通的化學發光檢測儀檢測讀數。多基因配合Luminex系統進行操作。
無需抽提純化RNA,無需反轉錄,無需PCR擴增
在傳統的PCR方法中,抽提步驟和RT-PCR的步驟在定量過程中是最受爭議的地方,而QG方法只需要簡單的細胞溶解過程。這個系統是全自動的,并且已經在臨床上應用十年以上。在精確度、準確性、重現性均高于Real-time PCR(Nat. Biotech. 2006,24(9), 1115-22)的基礎上,簡化操作步驟。單基因無需昂貴的設備,僅需要普通的化學發光檢測儀檢測讀數。多基因配合Luminex系統進行操作。
QuantiGene®2.0 Reagent System單基因表達精確定量
特點:
利用探針雜交技術與信號放大技術可迅速得到比Real-time PCR更加精確的定量結果。可分析組織、細胞、血液、福爾馬林浸泡、石蠟包埋等樣品,只需用特定裂解液裂解即可,對樣本量下限無要求。操作極其簡單,無需昂貴的儀器設備,用普通的化學發光檢測儀檢測讀數。
實驗流程:

QuantiGene® Plex 2.0 Reagent System同一反應多至40個基因表達的精確定量
特點:
同一反應孔中可同時對3-40個基因做精確定量,它可以分析的樣本包括組織樣、細胞、血液、福爾馬林浸泡、石蠟包埋組織、純化的RNA等等,只需要特定裂解液裂解樣本即可,對樣本下限無要求,特別適合需要對微量樣本做多基因定量的研究實驗。它無需抽提RNA、無需RT、無需PCR,因而避免了很多認為因素對實驗的干擾,而且可以快速得到準確的實驗結果。除了一些常規樣品如細胞、組織以外,QuantiGene Plex 2.0技術還特別適用于血液樣本與保存多年后mRNA高度降解的FFPE樣本。血液樣本含有各種酶的抑制物,FFPE樣本由于保存太久mRNA高度降解,這兩者均很難用傳統的Real-time PCR做分析研究,而QuantiGene Plex 2.0技術可以保證得到極高的準確度與重現性。相關文獻已陸續刊載于世界頂尖雜志。
實驗流程:

QuantiGene® Plex 2.0 Reagent System應用Luminex Technology技術配合Luminex儀器使用
對比:
是否抽提 是否RT-PCR 易用性 耗時性 效果 QG/QGP 否 否 裂解-上樣雜交,3步反應,多種多樣 需要過夜雜交 3個log線性 SYBR Green 是 是 抽提后RT-PCR,步驟繁多,樣品多 最快3個半小時 普遍5-6個log線性,低于TaqMan法的特異性與重復性 Taq Man 是 是 抽提后RT-PCR,步驟繁多,樣品多 最快3個小時 普遍7個log線性