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十大創新產品之Criterion無染料凝膠成像系統
【字體: 大 中 小 】 時間:2009年02月06日 來源:生物通
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凝膠分析從2小時縮短至2.5分鐘,Criterion Stain Free系統拋棄了考馬斯藍染色和銀染,徹底顛覆了傳統的蛋白凝膠分析流程,讓我們更輕松地獲得更準確的結果。因此,它被評為2008生命科學十大創新產品。
是不是已經厭倦了甲醇那刺鼻的氣味,還有考馬斯藍那一旦沾上就怎么也洗不掉的藍色?最最惱人的是,多么美好的青春歲月卻都花在染色和脫色上,脫不開身,連講座都沒辦法去聽。時間還要控制好,太短則染色不夠,太長又怕脫色過了頭。現在,你終于有機會和這一切說拜拜了。Bio-Rad公司在今年10月份推出了Criterion Stain Free gel imaging system,完全不需要染料,就能得到蛋白電泳的圖像,實現蛋白的檢測和定量。
你的第一反應肯定是:why?它的原理是什么?Criterion Stain Free技術源于2002年發表在《Analytical Biochemistry》上的一篇文章。文中指出聚丙烯酰胺中的蛋白可以進行快速檢測。方法是將蛋白膠浸泡在三氯乙酸或氯仿中,然后通過紫外光照射。在三氯化合物存在時,紫外光會驅使色氨酸發生反應,產物會發出可見區內的光,從而實現蛋白條帶在膠上的定位。Bio-Rad公司利用了這項技術,并進行了一定的改進,開發出這套無染料凝膠成像系統。
Criterion Stain Free gel imaging system的主要部件有兩個:Criterion預制膠,Criterion無染料成像儀。當然,為了分析結果,你還需要電腦和軟件。Criterion預制膠與普通的預制膠可不同,估計是含有三氯化合物,所以不能拿平時用的預制膠來代替。樣品制備及電泳步驟與普通的電泳一樣。電泳之后,取出凝膠,放置在Criterion 無染料成像儀中。分離的蛋白通過UV照射而激活,產生熒光,從而被CCD照相機捕獲。2.5-5分鐘后,蛋白的圖像就出來了,軟件還會根據蛋白Marker,自動估算每個蛋白條帶的分子量和數量,超級省心。
你看,完全用不著染料,也不需要等待,電泳完幾分鐘圖像就出來了,F在體會到科學技術是第一生產力了吧。生物通總結了Criterion Stain Free gel imaging system的特點,可以用一個單詞概括——FROGS,這可不是青蛙哦。
F (Fast)——快速
這個自不必說,與一般的考馬斯藍染色相比,起碼省了兩個小時。平常染色1小時,脫色半小時,還要洗啊、拍照、分析,怎么也得2個多小時吧,F在可好,5分鐘就搞定了,連分析都替你包辦了,直接出來一張分析報告,包括凝膠圖像、分子量和純度分析。而且系統中用的是預制膠,最煩人的配膠、等膠的時間也省了,即開即用。在快畢業或急著發文章的時候,這一點尤其重要。
R (Reproducible)——重復性好
有時候染色、脫色的時間不同,產生的膠圖也會相去甚遠。這里多一條帶,那里少一條帶,沒辦法進行比較。Criterion就不同,分析標準化,數據之間容易進行比較。另外一點還是要歸功于預制膠。預制膠雖然貴點,可還是貴的有道理。畢竟是工業化生產的,跟我們手工配制的就是不一樣,而且有時候試劑放太久了,配出來的膠其實就是不合格的,結果當然不會漂亮。
O (One-touch)——一鍵式操作
Criterion無染料成像儀長得有點像電腦主機,上面有一個大大的按鈕,就像開機鍵一樣。一摁,就開始自動的蛋白照相和數據分析,非常方便。而且軟件通過與蛋白Marker的比對,獲得的分析結果可比我們目測和估算準確多了。
G (Green)——環保
整個過程中,你再也無需和有毒的試劑如丙烯酰胺、甲醇等打交道,也不會產生有機污染物,更加環保。現在不都提倡這個嘛。大街上每個人都背著環保袋,上面寫著綠色生活什么的。
S (Sensitive)——靈敏
我想大家最關心的還是靈敏度。如果靈敏度太低,再簡便省時也是白搭。事實證明,Criterion Stain Free system的靈敏度與考馬斯藍染料相同或更高。而通過對一系列蛋白標準品進行LOD(檢測極限)和LOQ(定量極限)分析,兩者的數據也是相當,具體的分析步驟和結果請查看Bio-Rad公司的技術札記(Bulletin_5782)。
看到這里,總算明白FROGS的含義了吧。從2小時到2.5分鐘,Criterion Stain Free系統徹底顛覆了傳統的蛋白凝膠分析流程,讓我們更輕松地獲得更準確的結果。這也就是它入選生物通“2008生命科學十大創新產品評選”的最主要原因。
(生物通 余亮)
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