羅氏應(yīng)用科學(xué)創(chuàng)新的xCELLigence系統(tǒng)讓研究人員能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)并定量評(píng)估細(xì)胞的粘附和伸展。這項(xiàng)技術(shù)是非侵入性的，也不需要費(fèi)力且高成本的細(xì)胞標(biāo)記及細(xì)胞裂解或固定。用戶(hù)利用這種快速經(jīng)濟(jì)的方法，能在單個(gè)實(shí)驗(yàn)中監(jiān)測(cè)生物事件中基質(zhì)蛋白的作用。

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）蛋白如纖維連接蛋白與特定的細(xì)胞表面受體--整合素（Integrins）相互作用。整合素不僅調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附，還通過(guò)與ECM蛋白的相互作用啟始細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，指導(dǎo)不同的胞內(nèi)進(jìn)程。不同生物表面的細(xì)胞粘附是動(dòng)態(tài)、綜合的過(guò)程，需要細(xì)胞表面受體、結(jié)構(gòu)和信號(hào)蛋白以及細(xì)胞骨架的參與。

在一項(xiàng)xCELLigence系統(tǒng)的測(cè)評(píng)實(shí)驗(yàn)中，E-Plate包被了一層纖維連接蛋白或?qū)φ针亩巍�NIH3T3細(xì)胞接種到包被過(guò)的孔中，并通過(guò)測(cè)量阻抗變化并隨時(shí)記錄細(xì)胞指數(shù)（CI）單位，來(lái)監(jiān)測(cè)期間細(xì)胞粘附和伸展的程度。當(dāng)細(xì)胞接種在纖維連接蛋白包被的孔中，CI值顯著增加，而接種到對(duì)照肽段孔中的CI值僅僅緩慢增加。另外，阻抗測(cè)量顯示，纖維連接蛋白包被的細(xì)胞傳感器上的細(xì)胞粘附程度取決于纖維連接蛋白的濃度（已通過(guò)手工細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)驗(yàn)證）。這些數(shù)據(jù)支持了我們的設(shè)想----采用這項(xiàng)技術(shù)，細(xì)胞粘附和伸展可以在無(wú)標(biāo)記的條件下進(jìn)行實(shí)時(shí)定量的評(píng)估。

為了驗(yàn)證整合素受體功能的擾動(dòng)是否可通過(guò)這項(xiàng)阻抗技術(shù)來(lái)評(píng)估，成纖維細(xì)胞與整合素抑制肽段共同孵育，然后接種到纖維連接蛋白包被的E-Plate中。利用xCELLigence系統(tǒng)，證實(shí)抑制劑能以濃度依賴(lài)的方式阻礙NIH3T3細(xì)胞粘附和伸展，而對(duì)照肽段無(wú)此作用。

肌動(dòng)蛋白解離試劑在細(xì)胞粘附和伸展中的作用也能利用xCELLigence系統(tǒng)來(lái)監(jiān)測(cè)。成纖維細(xì)胞與肌動(dòng)蛋白聚合抑制劑共同孵育，然后接種到纖維連接蛋白包被的E-Plate中。肌動(dòng)蛋白聚合抑制劑的存在實(shí)際上以濃度依賴(lài)的方式抑制了細(xì)胞粘附和伸展。

參與整合素調(diào)節(jié)的細(xì)胞粘附和伸展的信號(hào)蛋白群還包括非受體酪氨酸激酶類(lèi)的Src家族。研究表明通過(guò)siRNA干擾或諸如PP2的小分子抑制劑干擾Src表達(dá)或活性，會(huì)導(dǎo)致人癌癥細(xì)胞粘附和伸展的破壞，這一結(jié)果與xCELLigence系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)結(jié)果相符。

更多關(guān)于這項(xiàng)技術(shù)的信息，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.xcelligence.roche.com。

點(diǎn)擊獲取羅氏近期xCELLigence講座信息。

關(guān)于羅氏應(yīng)用科學(xué)部
羅氏的診斷部門(mén)在成功收購(gòu)德國(guó)寶靈曼公司（Boehringer Mannheim GmbH.）后，成立了專(zhuān)業(yè)服務(wù)于科學(xué)研究領(lǐng)域用戶(hù)的羅氏應(yīng)用科學(xué)部（Roche Applied Science），憑借半個(gè)多世紀(jì)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域積累的經(jīng)驗(yàn)，羅氏應(yīng)用科學(xué)部已成為在此領(lǐng)域中具領(lǐng)先地位的試劑及系統(tǒng)供應(yīng)商之一。從耗時(shí)少的，全自動(dòng)的樣本制備系統(tǒng)（MagNA Lyser 和MagNA Pure），到快速精準(zhǔn)的卡盤(pán)式LightCycler®1.5/2.0和模塊式高通量LightCycler®480系列熒光定量PCR儀，以及創(chuàng)新的超高通量基因組測(cè)序系統(tǒng)Genome Sequencer FLX Systemhe和NimbleGEN高密度DNA芯片，以及最新的xCELLigence高通量實(shí)時(shí)細(xì)胞分析檢測(cè)系統(tǒng)，羅氏應(yīng)用科學(xué)部研究和開(kāi)發(fā)了多種應(yīng)用于分子生物學(xué)相關(guān)研究領(lǐng)域的系統(tǒng)和試劑產(chǎn)品――廣泛地應(yīng)用在基因組學(xué)和蛋白組學(xué)研究中；同時(shí)羅氏應(yīng)用科學(xué)部也提供用于生物醫(yī)藥和診斷行業(yè)方面的試劑，為用戶(hù)需求提供完整的解決方案。更多關(guān)于羅氏應(yīng)用科學(xué)部信息，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.roche-applied-science.com。（編譯 生物通余亮 校對(duì) 吳青）