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酶聯(lián)免疫斑點檢測（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay, ELISpot）技術(shù)可在單細(xì)胞層面上對抗體分泌細(xì)胞及細(xì)胞因子分泌細(xì)胞進(jìn)行檢測。對比傳統(tǒng)ELISA技術(shù)，ELISpot檢測的靈敏度更高，且檢測的是有生物活性的活細(xì)胞分泌抗原的功能。ELISpot是一種關(guān)鍵的檢測方法，已廣泛應(yīng)用于感染性疫苗和腫瘤疫苗的臨床藥效學(xué)評估、細(xì)胞與基因治療的臨床免疫原性評估等。
義翹神州在抗體開發(fā)及生物分析方法開發(fā)領(lǐng)域擁有深厚的技術(shù)經(jīng)驗，自主研發(fā)了高質(zhì)量的預(yù)包被ELISpot檢測試劑盒，經(jīng)PVDF板包被、無菌干燥、真空密封包裝等工藝流程制備，批次間一致性高，可精準(zhǔn)檢測IFN-γ、IL-2、IL-4等多種關(guān)鍵細(xì)胞因子，為疫苗研發(fā)、免疫治療、藥物篩選等領(lǐng)域的研究提供了有力支持。此外，義翹神州提供一站式的ELISpot檢測服務(wù)，以及支持完整的方法學(xué)驗證，滿足客戶的不同需求。
ELISpot檢測示意圖
ELISpot試劑盒產(chǎn)品列表
| 分子 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品訂購 |
| IFN-γ | EK11725A | Human IFN-γ ELISpot Kit (ALP) | 1 Kit (96 Tests) | 立即訂購 |
| EK50709A | Mouse IFN-γ ELISpot KIT (ALP) | 立即訂購 | ||
| EK50709B | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購 | ||
| IL-2 | EK11848A | Human IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | |
| EK51061A | Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | ||
| IL-4 | EK11846A | Human IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | |
| EK51084A | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | ||
| EK51084B | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購 | ||
| TNF-α | EK50349A | Mouse TNF-α ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 |
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產(chǎn)品驗證數(shù)據(jù)
Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A)
Sino Biological  |
Competitor M  |
The statistical histogram and representative plate images of mouse IFN-γ ELISpot assays. Splenocytes isolated from BALB/c mice were plated in graded densities (5×104–2.5×105 cells/well) and stimulated with Concanavalin A (ConA) for 20 h. Wells containing cells without stimulation served as the negative control.
客戶案例分享
案例一
評估病毒疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答
| 實驗?zāi)康模?/strong>采用IFN-γ ELISpot法評估病毒疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答 |
| 檢測因子：Mouse IFN-γ |
| 客戶評價：斑點清晰，背景干凈，實驗結(jié)果優(yōu)于進(jìn)口品牌 |
| 使用產(chǎn)品：Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) |
案例二
| 檢測因子： | Mouse IFN-γ, Mouse IL-2, Mouse IL-4 |
| 客戶評價： | 相同刺激下，三種細(xì)胞因子均可見大量斑點。與進(jìn)口品牌相比，義翹神州的FN-γ、IL-2斑點數(shù)更多，IL-4斑點也更清晰。 |
| 使用產(chǎn)品： | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51061A) Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51084A) |
案例三
ELISpot檢測服務(wù)
義翹神州擁有先進(jìn)的酶聯(lián)免疫斑點分析儀，能夠?qū)崿F(xiàn)對ELISpot板上各孔斑點圖像進(jìn)行全自動采集、計數(shù)及分析，支持疫苗、藥物篩選、細(xì)胞治療等領(lǐng)域的研究。我們提供專業(yè)的ELISpot檢測服務(wù)，可根據(jù)客戶的具體需求，量身定制合適的檢測分析方案，提供嚴(yán)格的方法學(xué)驗證，并出具詳細(xì)的分析結(jié)果報告。另外，我們還提供ELISpot讀板服務(wù)，利用儀器進(jìn)行自動讀板分析，為客戶提供每孔的斑點原始圖像和斑點數(shù)結(jié)果。
服務(wù)范圍疫苗評價、藥物篩選、免疫原性檢測等 服務(wù)周期3-5天 交付內(nèi)容斑點分析結(jié)果報告 |
 ELISpot分析儀 |
ELISpot實驗常見問題及改進(jìn)建議
| 問題描述 | 可能原因 | 改進(jìn)建議 |
| PVDF膜背景深，著色重 | 洗板不徹底 | 提高洗板次數(shù)，每次浸泡1分鐘 |
| 膜未完全干燥 | 確保PVDF膜完全干燥后再讀板 | |
| 陰性對照孔出現(xiàn)斑點 | 培養(yǎng)基、血清或DMSO中的內(nèi)毒素等污染物激活細(xì)胞，導(dǎo)致非特異性斑點產(chǎn)生 | 使用無內(nèi)毒素的試劑 |
| 細(xì)胞被污染 | 在處理板和細(xì)胞孵育過程中注意程嚴(yán)格無菌操作 | |
| 細(xì)胞存活率低 | 優(yōu)化細(xì)胞分離流程，確保細(xì)胞活率 >90%，保持功能性 | |
| 斑點形狀不規(guī)則或成團(tuán) | 細(xì)胞破損 | 優(yōu)化細(xì)胞提取流程，確保細(xì)胞活性 |
| 細(xì)胞聚集 | 鋪板前充分混勻細(xì)胞懸液，確保單細(xì)胞狀態(tài) | |
| 陽性對照孔斑點數(shù)少或斑點模糊 | 酶活力下降 | 提高酶濃度 |
| 顯色試劑溫度低，出現(xiàn)氧化現(xiàn)象 | 使用前將顯色試劑平衡至室溫，避免使用已氧化沉淀試劑 | |
| 刺激物效價低 | 提高刺激物濃度 | |
| 斑點位置不均勻，存在邊緣效應(yīng) | 鋪板后移動板子，細(xì)胞移位 | 鋪板后避免移動，輕拿輕放，平移放入培養(yǎng)箱 |
| 加刺激物時沖擊力大，沖散細(xì)胞 | 改為先加刺激物后加細(xì)胞 | |
| 板子堆放導(dǎo)致熱量不均 | 每塊板單獨放置于培養(yǎng)架上，確保熱量均勻分布 | |
| 讀板時即使對參數(shù)進(jìn)行了調(diào)整，但孔中斑點密集，無法識別全部斑點 | 細(xì)胞過多，斑點融合在一起 | 減少每孔加入的細(xì)胞數(shù)量 |
ELISpot技術(shù)資料
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